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最新一期6场半全场开奖:DNA合成

DNA合成簡介

6场半全场胜负玩法介绍 www.qkhchm.com.cn Oligo DNA的人工化學合成始于50年代初期,1980年,全自動的固相DNA合成儀面市后,使得快速、高效合成Oligo DNA成為可能,這極大地推動了生物工程技術的蓬勃發展。隨著生物工程技術發展,人工合成Oligo DNA的需求量越來越大,已經成為分子生物學實驗中最基礎的試劑之一。而合成Oligo DNA的質量,將會直接影響科研人員實驗計劃的順利進行。因此, 使用高質量的合成Oligo DNA制品變得尤為重要。


我公司合成Oligo DNA制品有如下特點:

1、高質量合成。使用進口試劑,合成高質量的DNA制品。

2、高純度純化。推出脫鹽純化、PAGE純化、HPLC純化三種級別制品,客戶可根據實驗需要選擇。我們保證對每個制品都進行嚴格的質量管理。

3、完善的數據。制品包裝中附有制品相關的多種數據,包括:合成的原始數據,A、G、C、T各堿基的分布情況,分子量,OD數,nmol數等,使用方便。



DNA合成的原理

現在一般都采用亞磷酰胺化學合成Oligo DNA片段,具有高效、快速偶聯以及起始反應物比較穩定的特點。該方法是在固相載體上完成DNA鏈的合成的,合成時從3"→5"方向進行,通常3"端的第一個堿基結合在Glass擔體(Controlled Pore Glass,CPG)上。Oligo DNA合成的原理基本相同,主要差別在于合成產率的高低、試劑消耗量和單個循環用時的不同。我公司采用的合成儀主要機型為ABI3900高通量合成儀。

合成的詳細過程見圖1,現簡要說明如下:



圖1 Oligo DNA合成原理圖。N1代表第一個堿基,N2代表第二個堿基,依次類推。



第一步三氯乙酸和預先連接在固相載體(CPG)上的第一個核苷酸反應(其活性基團處于被?;ぷ刺?,脫去核苷酸5‘-羥基的?;せ臘MT,獲得游離的5‘-羥基;
第二步活化新的堿基單體(Phosphoramidite),準備與第一個堿基進行反應;
第三步合成DNA的原料(亞磷酰胺?;さ暮塑賬岬ヌ澹┯牖罨了牡蚧旌?,得到核苷亞磷酸活化中間體,它的3‘端被活化,5‘-羥基仍然被DMT?;?,與溶液中游離的5‘-羥基發生縮合反應;
第四步帶帽(capping)反應,縮合反應中可能有極少數5‘-羥基沒有參加反應(少于2%),用乙酸酐和1-甲基咪唑終止其后繼續發生反應,這種短片段可以在純化時分離掉;
第五步在氧化劑碘的作用下,亞磷酰形式轉變為更穩定的磷酸三酯。(即將三價磷氧化成五價磷) (重復進行Step1~Step5的循環,直至合成完所需的Oligo DNA序列)
第六步合成結束后,將Oligo DNA分子從CPG上切下,再進行進一步的純化。


合成過程中可以觀察TCA處理階段的顏色判定合成效率。連接在CPG上的引物被切下來,通過, PAGE等手段純化引物,成品引物用C18濃縮、脫鹽,測定OD260定量,根據定單要求分裝。


DNA合成項目表


(一)常規合成(≤60bp)

片段長度

純化方式

規格

單價(/堿基)

發貨周期(工作日)

1540bp

OPC

2-5 OD

¥1.20

2

10 OD

¥1.80

2

30 OD

¥4.00

3

50 OD

¥8.00

3

15-60bp

PAGE

2 OD

¥1.60

3

5 OD

¥1.80

3

10 OD

¥2.20

3


(二)長鏈合成(>60bp)

片段長度

純化方式

規格

單價(/堿基)

發貨周期(工作日)

6180bp

PAGE

2 OD

¥4.00

3

5 OD

¥6.50

3

10 OD

¥8.00

3

81-100bp

PAGE

1 OD

¥8.00

3


(三)硫代修飾(SPO3)

量(OD)

發貨時間(工作日)

純化方式

單價(¥)

2

4

PAGE

8.00/base

5

4

PAGE

12.00/base

10

4

PAGE

15.00/base

30以上

待詢

PAGE

詢價


(四)特殊堿基

種類

產量(OD)

發貨時間

純化方式

單價(元/堿基)

dI

2

4

PAGE

80

5

4

PAGE

120

dU

2

4

PAGE

100

5

4

PAGE

140

5甲基化dC

2

4

PAGE

300

5溴dU

2

4

PAGE

300


(五)修飾/標記引物

分類

修飾/標記

純化方式

2 OD

5 OD

10 OD

磷酸基團(Phosphorylation)

5" PO4

HPLC

¥200.00

¥300.00

¥400.00

3" PO4

HPLC

¥300.00

¥350.00

¥500.00

NH2修飾(Amino Linkers)

5" or 3" NH2 C3

HPLC

¥450.00

詢價

詢價

5" NH2 C6

HPLC

¥200.00

¥300.00

¥450.00

3" NH2 C7

HPLC

¥200.00

¥300.00

¥450.00

5" NH2 C12

HPLC

¥450.00

¥600.00

¥800.00

5" NH2 C6 dT

HPLC

¥500.00

¥700.00

¥1,000.00

3" NH2 C6 dT

HPLC

¥350.00

¥500.00

¥800.00

SH 修飾 (Thiolation)

3" SH C3

HPLC

¥350.00

¥480.00

¥600.00

5" SH C6

HPLC

¥400.00

¥500.00

¥800.00

Spacers

Spacer C3

HPLC

¥280.00

¥350.00

¥500.00

Spacer C6

HPLC

¥280.00

¥350.00

¥500.00

Spacer 9

HPLC

¥280.00

¥350.00

¥500.00

Spacer 18

HPLC

¥400.00

¥500.00

¥800.00

dSpacer

HPLC

¥500.00

¥700.00

¥1,000.00

生物素(Biotin)

5" Biotin

HPLC

¥300.00

¥350.00

¥500.00

3" Biotin

HPLC

¥350.00

¥400.00

¥600.00

5" Biotin TEG

HPLC

¥700.00

詢價

詢價

3" Biotin TEG

HPLC

¥600.00

詢價

詢價

5" Dual Biotin

HPLC

¥1,800.00

詢價

詢價

5" or Internal Biotin dT

HPLC

¥700.00

¥900.00

¥1,500.00

5" PC Biotin

HPLC

¥1,800.00

詢價

詢價

地高辛(Digoxin)

5" or 3" Digoxin

HPLC

¥600.00

¥800.00

¥1,200.00

熒光基團(Fluorophores)

5" Cy3

HPLC

¥1,200.00

¥1,500.00

¥2,500.00

3" Cy3

HPLC

¥1,300.00

¥1,600.00

¥2,600.00

Internal Cy3

HPLC

¥1,400.00

詢價

詢價

5" Cy5

HPLC

¥1,100.00

¥1,500.00

¥2,500.00

3" Cy5

HPLC

¥1,000.00

¥1,800.00

¥2,600.00

Internal Cy5

HPLC

¥1,400.00

詢價

詢價

5" FAM

HPLC

¥280.00

¥320.00

¥450.00

3" FAM

HPLC

¥300.00

¥350.00

¥500.00

5" HEX

HPLC

¥450.00

¥600.00

¥900.00

5" TET

HPLC

¥450.00

¥600.00

¥900.00

5" 6-JOE

HPLC

¥550.00

¥650.00

¥900.00

3" 6-JOE

HPLC

¥550.00

¥700.00

¥1,000.00

5" Rox

HPLC

¥500.00

¥600.00

¥900.00

3" Rox

HPLC

¥550.00

¥700.00

¥1000.00

5" TAMRA

HPLC

¥450.00

¥600.00

¥850.00

3" TAMRA

HPLC

¥500.00

¥650.00

¥950.00

5" FITC

HPLC

¥300.00



3" FITC

HPLC

¥350.00



Internal TAMRA

HPLC

¥1000.00

詢價

詢價

淬滅基團(Quenchers)

3" DABCYL

HPLC

¥750.00

¥900.00

¥1,200.00

3" BHQ 1

HPLC

¥600.00

¥800.00

¥1,100.00

3" BHQ 2

HPLC

¥600.00

¥800.00

¥1,100.00

電化學標記(Electrochemicals)

Ferrocene

HPLC

¥550.00

¥700.00

¥1,000.00

其它

電詢


(六)雙標記熒光探針

分類

標記

純化方式

2 OD

5 OD

10 OD

3" TAMRA

5" FAM-3" TAMRA

2次HPLC純化

¥1,000.00

¥1,200.00

¥1,800.00

5" HEX-3" TAMRA

2次HPLC純化

¥1,400.00

¥1,600.00

¥2,000.00

5" TET-3" TAMRA

2次HPLC純化

¥1,400.00

¥1,600.00

¥2,000.00

5" JOE-3" TAMRA

2次HPLC純化

¥1,400.00

詢價

詢價

3" DABCYL

5" FAM-3" DABCYL

HPLC

¥1,000.00

¥1,200.00

¥1,800.00

5" HEX-3" DABCYL

HPLC

¥1,200.00

¥1,400.00

¥2,000.00

5" TET-3" DABCYL

HPLC

¥1,200.00

¥1,400.00

¥2,000.00

5" JOE-3" DABCYL

HPLC

¥1,300.00

詢價

詢價

5" TAMRA-3" DABCYL

HPLC

¥1,400.00

詢價

詢價

5" Cy5-3" DABCYL

HPLC

¥1,300.00

¥1,600.00

¥2,000.00

3" BHQ1

5" FAM-3" BHQ1

HPLC

¥1,000.00

¥1,200.00

¥1,450.00

5" HEX-3" BHQ1

HPLC

¥1,200.00

¥1,400.00

¥1,800.00

5" JOE-3" BHQ1

HPLC

¥1,100.00

詢價

詢價

BHQ2

5" ROX-3" BHQ2

HPLC

¥1,000.00

¥1,300.00

¥1,800.00

ECLIPSE

5" FAM-3" ECLIPSE

HPLC

¥1,000.00

¥1,200.00

¥1,800.00

5" HEX-3" ECLIPSE

HPLC

¥1,000.00

詢價

詢價

5" TET-3" ECLIPSE

HPLC

¥1,200.00

詢價

詢價

5" JOE-3" ECLIPSE

HPLC

¥1,100.00

詢價

詢價

5" TAMRA-3" ECLIPSE

HPLC

¥900.00

¥1,200.00

¥1,800.00

5" Rox-3" ECLIPSE

HPLC

¥900.00

¥1,200.00

¥1,800.00

其它

電詢


(七)、簡并堿基及代碼

簡并代碼MRWSYKVHDBN
代表堿基A/CA/GA/TC/GC/TG/TA/C/GA/C/TA/G/TC/G/TA/C/G/T